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新聞中心

消滅細胞污染

當清晨的陽光滿照大地時,在細胞培養室的角落,倒置顯微鏡旁,總會聚集著幾個孩紙,時不時的各種感慨。啊……細胞又長滿了!咦……細胞咋飄了好多?唉……這個細胞狀態好差,能不能長起來?完了完了,細胞污染了……

 

各種細胞,總會有各樣問題讓人猝不及防。

 

雖說細胞培養是基礎性的技術,但并不是每個人都能把每種細胞養的很好呢!

 

今天小編就來說說細胞培養室里細胞污染的事兒。

 

常見的細胞污染除了來自其它細胞系的交叉污染外,包括支原體、**、**污染。這些微生物污染對細胞產生的影響很大呢!例如,它們會與宿主細胞競爭營養;分泌酸性或堿性的副產物,使宿主細胞停止生長;產生對細胞直接有毒的H2O2等等。

 

有同學說,我使用了無菌的試劑和耗材,也遵循了無菌操作的要求,然而……還是莫名污染了。隔壁的同學還沒有我做的仔細呢!

 

那么,這種情形下,細胞到底為什么會污染呢?細胞污染要怎么辦呢?

 

小編覺得此同學和彼同學,*大的差異恐怕是操作環境了。給大家提個醒,細胞培養室的環境控制尤為重要啦。

 

有這樣一篇文獻[1],作者對比了正常細胞培養室和污染培養室,在可能污染的位置放了血培養皿,根據微生物的生長狀況,研究細胞污染的原因。以下是代表性的培養結果。

 

 

 

 

 

污染物是毋庸置疑的源頭,培養室的空氣、培養箱內循環的空氣、培養箱的層架以及顯微鏡的載物臺和物鏡都可能是污染源。

 

其實,特別容易成為污染源的地方有這么幾個:

 

1)空調(估計是細胞培養室沒有做層流,也不經常清洗)。

2)生物安全柜的空氣過濾系統。

3)生物安全柜的進風口(如下圖黃線圈出的位置,操作不慎的話,很容易把培養基或者血清之類的東西滴進這個風口,里面長個霉什么的都是正常的,因為你不會及時拆開清理)。

 

 

 

 

4)顯微鏡(一般也不會有人用84擦顯微鏡吧)

 

。

5)培養箱的水盤和復蘇細胞用的水浴鍋(基本上是溫床,但是可以在里面加入硫酸銅,并且周期性更換來避免長菌,但問題是硫酸銅會損傷不銹鋼)。

6)離心機(也是重災區)。

7)液氮罐(這個估計大家都不會注意的,但好在液氮罐污染可能性比較低)。

 

如果出現細胞污染的情況,勸你直接加入84,滅活以后丟棄。萬一不幸,**肆虐,細胞培養室還要用甲醛熏蒸。

 

但是,你的細胞特別珍貴,污染了,怎么辦?那就要用***了!

 

1)、*常用:青霉素、鏈霉素聯合抑制**,即所謂的“雙抗”,主要針對革蘭氏陽性菌、陰性菌;對于**的感染也可用慶大或卡那霉素;


2)、如果**污染嚴重,可用兩性霉素/制霉菌素控制;


3)、若為支原體污染,可用慶大霉素/四環素/紅霉素;

 

注意,抑制**的***,對細胞都有比較大的傷害。使用前,一般都建議先做預實驗,估計對細胞本身的影響。

本次的細胞培養就寫到這里。關于細胞培養更多的故事,請后續關注~

 

今天,你的細胞還好么?

 

 

 

滬公網安備 31011402005095號

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